人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu),操作步驟及信息說明等咨訊由上海遠慕生物提供,本司供應(yīng)銷售進口/國產(chǎn)ELISA檢測試劑盒,供免費代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,種屬包含大鼠ELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒,人ELISA試劑盒,馬ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,犬ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,駱駝ELISA試劑盒及其他動物試劑盒,了解更多種屬洽談!
人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)
【信息說明】
中文名:人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒
別名:人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA Kit
供應(yīng)商:上海遠慕
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
特點:敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒:白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉(zhuǎn)化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。
適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床。
【組織結(jié)構(gòu)】
1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng) 在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
【使用原理】
1、ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
3、在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
4、用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。
5、此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
6、由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。
【安全性】
1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2、實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
5、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
10、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
【操作步驟】
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘。
7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。